在上一篇干货分享中，我们已经深入了解了Western Blot实验中蛋白浓度的四种测定方法。本篇文章将重点讨论样本制备过程中常见的问题，并探讨相应的解决方案。作为生物医疗领域的权威品牌，环亚集团·AG88致力于提供全面的技术支持与解决方案，帮助科研人员高效开展实验。

常见问题及解决方案

问题一: 蛋白浓度低

蛋白浓度过低的原因可能包括：1. 细胞或组织量不足；2. 样本与裂解液的比例不合适；3. 样本未充分裂解；4. 选用的蛋白浓度测定方法不当。

解决方案： 1. 适当增加样本量；2. 根据样本数量调整裂解液的体积，例如对于100万细胞或20mg组织，添加100-200μL的裂解液；3. 确保裂解时间充足，通常在低温下保持10-30分钟，组织样本可通过物理破碎，细胞样本则需通过吹打或颠倒混匀；4. 选择合适的蛋白浓度测定方法，提高准确性。

问题二: 出现透明胶状物

透明胶状物的产生常因基因组复合物的释放。此时可采取以下措施：

解决方案： 1. 适当超声或使用1mL注射器反复抽吸，打断基因组DNA，从而消除粘稠感；2. 在加入Loading buffer并进行煮沸变性时，可以适当延长煮沸时间，既有助于蛋白质的充分释放，也能部分断裂基因组DNA；3. 加入广谱核酸酶，增强裂解效果。

问题三: 上清漂浮一层油脂

当样本富含脂肪时，常会出现上清漂浮油脂的现象。解决这一问题的方法包括：

解决方案： 1. 裂解后将样本低温静置，吸出漂浮的油脂；2. 若吸取后依然不理想，可以尝试使用二氧化硅吸附以去除多余的脂肪。

以上就是关于样本制备中常见问题及其解决方案的分享。借助环亚集团·AG88的专业服务，科研人员能够更有效地应对实验中的挑战，确保实验的顺利进行。