实验原理：本实验旨在通过使用脂类染料（如苏丹黑或油红O）对血清脂蛋白进行预染，然后将预染的血清样本进行琼脂糖凝胶电泳分离。电泳过程中，脂蛋白会向正极移动，并形成多个色带。

所需试剂与器材： 1. 巴比缓冲液（pH 8.6，离子强度 0.075）：制备方法为将巴比/妥钠154g、巴比/妥276g、EDTA酸0.292g加水溶解，并稀释至1000ml。 2. 三羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH 8.6）：凝胶缓冲液由三羟甲基氨基甲烷121.2g、EDTA酸0.29g、NaCl158.5g 与水溶解后稀释至1000ml制成。 3. 琼脂糖凝胶：将0.45g琼脂糖、50ml三羟甲基氨基甲烷缓冲液和50ml水混合加热至沸腾，直至琼脂糖完全溶解。 4. 挖槽工具：包括切口刀和挖槽小匙。切口刀由刀片（长15mm）和夹持有机玻璃或木片的螺丝构成，挖槽小匙用直径15mm的铜丝制作。 5. 电泳槽及电泳仪：与血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳所用设备相同。

操作步骤： 1. 预染血清：在小试管中将0.2ml的血清与0.2ml的苏丹黑染色液混合，置于37℃水浴中染色30分钟后，离心2000转/分约5分钟。 2. 制备琼脂糖凝胶板：将制备好的0.45%琼脂糖凝胶在沸水浴中加热融化，然后用吸管将25ml的凝胶溶液倒入载玻片中，静置约半小时凝固。 3. 点加血清：在已固化的琼脂糖凝胶板的一端约2cm处用切口刀垂直切入，再用铜丝小匙取出小条凝胶。用滤纸吸干小槽内的水分，利用血色素吸管加入约15μl的预染血清。 4. 电泳：将加过血清的凝胶板平行放入电泳槽中，样品应位于阴极一端。将浸润在巴比/妥缓冲液中的三层纱布轻轻贴在凝胶板两端，并要确保电极缓冲液不被替换为其他缓冲液。接通电源，电压设置为120~130V，电流为每片3~4mA，电泳时间约为15至55分钟，直至观察到分离的色带。

注意事项： 1. 电泳样品须为新鲜的空腹血清。 2. 每块凝胶可平行挖两条小槽，以便于加样。 3. 如需保留电泳样本，可将电泳后之凝胶板放于清水中浸泡脱盐2小时，之后在80℃的烘箱中烘干。 4. 如果在样本中出现乳糜微粒，说明可能存在高甘油三酯血症，应密切关注。

结果及临床意义： 1. 正常人血清脂蛋白呈现三条区带：从负极至正极依次为β-脂蛋白、前β-脂蛋白和α-脂蛋白，原点处不应存在乳糜微粒。 2. 如果前β-脂蛋白的颜色比α-脂蛋白深，且伴随血清甘油三酯升高，且胆固醇水平正常或略高，表明可能为Ⅳ型高脂蛋白血症。 3. 按β-脂蛋白的显著加深及胆固醇异常升高的情况可以判定为Ⅱa型或Ⅱb型高脂血症。 4. 若β-和前β-区带未分离被称作“宽β区带”，伴随糖类和胆固醇升高，可能为Ⅲ型高脂血症。 5. 当血清中出现乳糜微粒，且其他脂蛋白正常或降低，结合显著升高的甘油三酯，则可能为Ⅰ型高脂血症。

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