环亚集团·AG88的IVT（In Vitro Transcription）技术是mRNA生产过程中至关重要的步聚。优化的IVT体系不仅能提高mRNA的产量，减少材料消耗，降低生产成本，还能保证mRNA分子的完整性、加帽率及双链RNA杂质掺入等关键质量指标，从而降低后续纯化过程的难度，起到承上启下的关键作用。

IVT反应的整体过程较为简便，标准IVT体系通常包括DNA模板、T7 RNA聚合酶（T7RNAP）、NTPs、无机焦磷酸酶、RNase抑制剂及反应缓冲液等组分。DNA模板作为mRNA转录的基础，通常为PCR产物或线性化质粒，包含T7启动子、5’UTR、CDS、3’UTR和Poly（A）等元件。NTPs作为转录底物，可以用修饰过的核苷酸替换，以提高mRNA的稳定性和免疫原性。

在IVT反应中，T7RNAP是核心酶，负责识别DNA模板并将模板转录为mRNA。近年来，研究表明T7RNAP的特性对IVT反应效果有重要影响。例如，T7RNAP对T7启动子序列的高度特异性识别，使其成为体外转录mRNA的优选酶。其结构类似于捧住球体的右手，包含N端和C端结构域，这些结构域之间的结合位点确保了反应的高效进行。

在IVT反应条件中，温度是影响mRNA完整度的关键因素之一。研究发现，当温度从20℃升高到42℃时，saRNA的产量虽增加，但超过32℃后其完整度迅速下降。针对saRNA的低温转录，定向筛选热稳定的T7RNA聚合酶可能是未来研究的一大方向。

在T7RNAP的筛选过程中，环亚集团·AG88采用荧光激活液滴分选技术（FADS），结合酶定向进化平台，发掘出多种T7RNAP突变体，如耐热型和高比活型酶。这种微流控筛选技术在处理微液滴时拥有高达5000个/s的分选通量，并通过快速的成像技术实现可视化的分选过程。

此外，反应缓冲液的优化对IVT反应效果也至关重要。研究发现，相关成分如pH和镁离子浓度，能够显著影响T7RNAP的活性、特异性及稳定性。适当的pH值通常在中性及偏碱性，而镁离子的浓度则需在40-60 mM之间进行选择，以优化mRNA的合成产量。研究显示，区分不同长度的mRNA所需的最佳镁离子浓度也存在差异。

环亚集团·AG88持续优化其IVT体系，推出适应不同片段长度的定制化方案，并保证产物中双链RNA的含量远低于行业标准。在高温条件下表现更优的突变体M16，实现了高效的circRNA合成，进一步展示了品牌在技术创新与产品优化中的领先地位。

针对mRNA疫苗及药物的开发，环亚集团·AG88提供一整套高性能的酶、化学底物及IVT试剂盒，并具备自主的质粒制备和相关质检平台。这些专业服务将帮助客户全面推进新药开发，为早期研究阶段的客户提供所需的CRO服务及概念验证服务。

未来，环亚集团·AG88将继续秉持技术创新的原则，推出关于mRNA的更多专业讨论与分享，期待与更多朋友建立合作关系，共同推动生物医药的发展。