实验性自身免疫性脑脊髓炎（Experimental Autoimmune Encephalomyelitis, EAE）是研究多发性硬化（MS）的金标准动物模型，通过模拟自身免疫性T细胞攻击中枢神经系统（CNS），再现MS的神经炎症、脱髓鞘及神经功能障碍等核心病理特征。EAE模型在MS发病机制研究、神经免疫调节药物筛选（如Roflumilast）、髓鞘修复与神经保护疗法开发等领域中被广泛应用。

依托专业的研发实力和严格的质量控制体系，环亚集团·AG88精心打造了高稳定性、高重复性的EAE模型研究全套试剂组合，其造模核心试剂具有以下优势：

• ✅现货速发：百日咳毒素国内现货，极高纯度（99%），高品质与高性价比。
• ✅高发病率：C57BL/6小鼠免疫后10-14天稳定发病（临床评分2-4分）。
• ✅病理重现性良好：明确髓鞘脱失（LFB染色）与Th17细胞浸润（流式验证）。
• ✅多维评价体系：支持临床评分、行为学、组织病理学、分子生物学等全维度验证。

EAE模型核心试剂

（1）免疫原（抗原）：MOG₃₅₋₅₅（髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55肽段），来源为人工合成肽，浓度通常为150-300μg/只小鼠（溶于PBS、生理盐水或CFA中）。

（2）佐剂：完全弗氏佐剂（CFA, Complete Freund’s Adjuvant），包括矿物油及灭活结核分枝杆菌（如Mycobacterium tuberculosis H37Ra，浓度4-5mg/mL），用于增强免疫应答，与MOG₃₅₋₅₅乳化后使用。

（3）免疫增强剂：百日咳毒素（Pertussis Toxin, PTX），剂量为200-500ng/只小鼠（腹腔注射），注射时间为免疫当天（Day 0）及第2天（Day 2），旨在破坏血脑屏障，促进T细胞浸润中枢神经系统。

EAE模型诱导方法

（1）实验准备：通常选择6-8周龄的雌性C57BL/6小鼠或Sprague-Dawley大鼠，每组至少需要10只动物以确保统计学意义。动物应在实验环境中适应1周，保持温度、湿度和光照条件稳定。试剂准备时，将MOG₃₅₋₅₅肽溶解于生理盐水中，与等体积的CFA混合乳化，形成均匀乳剂。

（2）EAE诱导：第0天，准备乳剂，将300µg MOG₃₅₋₅₅肽与300µL CFA混合乳化后，分两次（每侧100µL）皮下注射于小鼠双侧腋窝、腹股沟及背部，同时进行腹腔注射200ng PTX。第2天再次注射200ng PTX。

EAE模型验证

EAE模型的验证需要通过临床评估、行为学、组织病理学及分子生物学等多个维度进行，以下是系统的验证方法分类及操作要点：

（1）临床评分验证：采用0-5分量表，包括无症状、尾部无力、后肢无力、后肢瘫痪、四肢瘫痪及死亡等评分。同时需监测体重，通常EAE小鼠伴有体重下降，持续下降可能需伦理干预。

（2）行为学检测：运动功能评估可通过转棒实验（Rotarod）及步态分析（CatWalk等）进行；抑郁样行为检测可通过强迫游泳实验（FST）与悬尾实验（TST）实现。

（3）组织病理学验证需进行灌注固定与切片制备，使用HE染色、LFB染色及免疫组化等方法进行病理评价。

（4）分子生物学验证可通过流式细胞术分析细胞亚群、ELISA检测细胞因子，以及Western Blot分析蛋白表达等技术。

常见问题与解决方案

在EAE模型的研究过程中，可能会出现无临床症状、死亡率高、病理结果阴性等问题，每种情况均需分析原因并采取针对性解决方案。

特色应用案例

在东南大学医学院神经精神病学研究所，张志珺教授团队采用EAE大鼠模型研究Roflumilast的作用，结果表明Roflumilast可能成为改善MS抑郁症状的潜在药物。研究为进一步阐明MS与抑郁症的发病机制提供了重要线索。

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